IHC studija - pomoć u dešifriranju biologije raka dojke

Unatoč činjenici da sve više i više klinike počinje koristiti tehnike genetskog fenotipizacije tumora IHC studija ostaje i danas glavni alat u dešifriranju biologije raka dojke, u predvidjeti budući razvoj „prediktor” odgovora tumora na planiranom liječenju.

U ovom članku ćete saznati što je imunohistokemijski (IHH) studija, značaj IHC ima rak dojke.

Histokemija (odjeljke histologiju bojanja)

Prije patolog (morfologija) počinje pod mikroskopom dijela tkiva dojke dobivenih od biopsije, potrebno je obojiti svoje posebne boje.

Histokemijske boja nanosi tanki presjeka tkivnom se vidi pod mikroskopom, stanice koje su prisutni, njihov raspored u odnosu na drugi (struktura tkiva). Svjetlosna mikroskopija je rutinska metoda za proučavanje obojenih presjeka tkiva, naširoko koristi u dijagnostici raka dojke. Sekcije Najčešće bojenje tkiva koriste:

• Hematoksilin - mrlje stanične jezgre u tamno plave boje;
• Eozinom - što ružičasti citoplazmu stanice. Dijeljenje ih hematoksilin-eozinom zove bojenja.

Što je imunohistokemijski (IHH)

Patolog - liječnik, koji je dugo studirao na Sveučilištu u Medical, da znaju kako se koristi mikroskop razlikovati obojenih stanica raka profili od normalnog tkiva. Obično dijagnoza (benigni ili maligni patologija) dovoljno je uzeti u obzir pod odjelima mikroskopskih tkiva obojeni hematoksilinom i eozinom. No, ponekad to nije dovoljno. U takvoj situaciji, pomoć dolazi imunohistokenuje, koji je morfološka identifikacija stanica i tkiva dodaje imunološku komponentu.

Postupak imunohistokemija (IHH) otkrivanje morfoloških komplementarnih stanica i tkiva pomoću antitijela na poznate antigene koji su specifični za određene vrste stanica ili staničnih komponenti. Položaj ovih protutijela može se vidjeti svjetlosnim mikroskopom, budući da su protutijela uključuju vizualno-prepoznati oznaku.

Prvi tehnika imunohistokemijska analiza karcinoma dojke pomoću antitijela s priloženim fluorescentnim oznakama, koji zahtijeva uporabu posebnih fluorescentnim mikroskopom, čime lokalizacije ovih antitijela vidi rez u tkivu dojke.

Tijekom proteklih 30 godina je značajno pojednostavniti tehnika koja se koristi za istraživanje raka dojke IHC upotrebom specifičnih antitijela (monoklonska antitijela) s enzimske oznake. To je, pak, dozvoljeno korištenje svjetlosnim mikroskopom s istraživanjima imunohistološka raka dojke, koji je znatno jeftiniji i stoga više dostupni. Međutim, radioaktivni elementi (peroksidazu, alkalne fosfataze i fluoresceinom), bez koje ponekad ne zahtijevaju posebne tehnike i još uvijek se naširoko koristi.

Nužnost korištenja imunohistokemije raka dojke, kontrolirati njegovu kvalitetu i tumačenje rezultata treba pratiti patologiju. Važno je da su podaci dobiveni na dekodiranje IHC studija koristi samo u kombinaciji s morfološkom analizom tkiva dojke, dobivena bojenje hematoksilinom i eozinom.

Danas imunohistokemijski raka dojke je najviše rutinskih metoda u morfološkim (patohistološke) laboratorija i služi za dijagnozu i prognostički svrhu, kao prediktivni (prediktivni) pokazivač ponašaju kao rak dojke u budućnosti.

Dijagnoza raka dojke i IHC

Kada je patolog vidi pod mikroskopom biopsijom materijala, on se suočava s dva osnovna dijagnostičkih zadataka: utvrditi podrijetlo tumorskih stanica, gdje su (u kanalima, u lobules, ili u drugim dijelovima dojke) i potvrdila ili isključila prodor okolno tkivo.

Dijagnostički IHC markeri koriste za rak dojke

Od prvih dana korištenja u onkologiji IHC je provedeno u potragu za novim i poboljšanim tehnikama koriste postojeće antitijela koja bi mogla identificirati stanice antigena s visokom specifičnošću i osjetljivošću. Sljedeći IHC markeri su sada široko koristi pojasniti patohistološku dijagnozu raka dojke:

Citokeratini

• CK5, CK10, CK14 i CK17 su citokeratin bazalni sloj epitela, mioepitelnim stanicama izražena.
• CK5 / 6 ili „bazalni Citokeratini” pomoći odrediti uobičajenom dojke mioepitelnim stanice kao laminarno (luči).
• 34 12: antitijelo se pomaže prepoznati citokeratine 1, 5, 10 i 14.

Markeri glatkih mišića

• H-caldesmon. Ona se može naći samo u grudi duktalnih mioepitelnim stanica, tako da ima visoku specifičnost.
• Glatkih mišića aktin (SMA). Ovo antitijelo pomaže otkriti aktin u niskom mikrofilamentah- specifičnost, jer SMA je otkrivena u fibroblastima (u tkivima koje se regenerira).
• glatkih mišića miozina teškog lanca (SMMHC) - strukturna komponenta u glatkih mišića miozina izooblika SM2. Izražava mioepitelnim stanicama dojke, ima visoku osjetljivost i specifičnost, kao SMMHC prisutan samo u stanicama koje su organizirane na mioepitelnim kanala i lobules u mliječnoj žlijezdi, ali ne i u fibroblastima vezivnog tkiva žlijezde.
• Calponin - polipeptid 34 kDa, modulira aktivnost actomyosin. Dobro osjetljivost, ali je prisutan u mliječnim fibroblasta iz vezivnog tkiva.
• P63-p53 homologa - nuklearna marker je vrlo osjetljiva mioepitelnim stanicama.
• CALLA: Endopeptid, koji je izražen u mioepitelnim stanicama.
• P-cadherimolekula stanične adhezije visoke osjetljivosti na mioepitelnim stanicama normalnog tkiva dojke - n. To ne reagira s fibroblaste.

ostali markeri

• E-kadherina - cell adhesion molecule. To se koristi za razlikovanje duktalni karcinom „in suti” (DCIS) od nakupina. Karcinom „u suti” (inicijativa) - DCIS, obično identificiran pomoću bojanja membrane, za razliku od inicijativa u kojoj to nije.
• markeri melanoma: S100, Melan-A, HMB45.
• limfocita markeri: CD20, LCA, CD15, CD30.
• Vaskularni endotelni markeri: CD31, CD34, faktor VIII, d2-40 (podoplanin).
• stanica proliferacije markeri: Ki67 MIB-1 PPh3.
• apoptoza markeri: Bcl-2 i Bax, Bcl-X.

Primjeri uporabe IHC rješavanja problema u određivanju patologije dojke

Postoje mnoge situacije u kojima imunohistokemijski doprinosi oblikovanju konačnog patohistološku dijagnozu u patologiji dojke:

• Bojenje e-kadherina staničnu membranu uklanja nakupina neoplazija (ALH) i inicijativa. Nedostatak bojanja stanične membrane pogoduje nakupina tumora.
• Normalno epitelnih hiperplazija, epitelne duboko invazivne ili ovo ili ono DCIS. U benigne hiperplazije može otkriti reaktivnost CK5 / 6 i CK14, dok je s atipičnom hiperplazijom i DCIS ne.

Ovaj mikro-invazivni karcinom ili nešto drugo? Primjena mioepitelnim stanicama markera je ključna za određivanje da li ili ne invaziju mikro karcinom (invaziju laminarnog sloja mioepitelnim stanicama). Reaktivnost fibroblasta, jaz u bojanja stanica, mioepitelnim bojenje glatkih mišićnih stanica može uzrokovati poteškoće u tumačenju promatranog uzorka pod mikroskopom. Dva markera mioepitelnim stanice korištene u ovoj situaciji, primjerice, p63 i SMMHC ili Asma ili calponin.

Što IHC markeri koriste u dijagnostičke ploče u patologiji dojke

Skup oznaka (dijagnostički ploča), koji se koristi u IHC studija raka dojke, u velikoj mjeri ovisi o opremi laboratorija u kojem se provodi imunohistokenuje, i iskustvo liječnika to vodi. U nastavku su preporuke koje IHC ploča treba upotrebljavati kad dojke patologija, pod uvjetom da jedan od klinika:

• Miozin teški lanci glatkih mišića (SMMHC) ili - calponin osjetljivih i specifičnih markera za mioepitelnim stanicama citoplazme;
• Glatkih mišića aktin može koristiti, ali i dalje u tumačenju treba imati na umu da je prisutan u fibroblasta (upala i ožiljaka);
• P63 je osjetljiv i specifičan marker za jezgru mioepitelnim stanica bojanjem, ali može biti isprekidan. Upotreba markera u citoplazmu mioepitelnim stanica kao što su SMMHC ili calponin, treba koristiti kako bi se izbjegle bilo kakve probleme u tumačenju slike dobivene.

Kada pokušavate utvrditi prisutnost ili odsutnost mioepitelnim stanica i p63 treba koristiti SMMHC ili calponin.

Uloga imunohemije u definiciji „budućnost” i „predviđanje” faktora u raka dojke

Prognostički čimbenici pružaju informacije o mogućem ponašanju raka dojke u vrijeme dijagnoze i neovisno o terapiji. To je, uz pomoć njih možete prosuditi koliko će brzo razviti i rak, odnosno, ovisno o tome odlučiti koliko i tretman prednost u svakoj situaciji.

S druge strane, „prediktivni” (predvidjeti) čimbenici pružaju informacije koje daje naznaku vjerojatnosti tumorskog odgovora na određenu terapiju. Unatoč činjenici da su prognostički i prediktivni faktori mogu organizirati odvojeno u dijagnostici i klasifikaciji raka dojke češće su i prognostički i prediktivni.

Na primjer, prisutnost visokog ekspresiju HER2. Ako rak dojke HER2 pozitivnim (veliki broj HER2 proteina u tumor), potrebno je agresivan, s početkom metastaze udaljenim organima. Ali, ako je tumor sadrži malu količinu tog proteina (rak dojke HER2 negativan), to neće reagirati na korištenje ciljanog lijeka Herceptin.

„Bazalna” IHC markeri

Postoji podjela Rak dojke ovisno o tome koji su geni eksprimiraju na stanicama (ekspresija gena profil). Tumori profil koji je karakterističan za osnovnim ili mioepitelnim stanicama normalnog dojke, pokazat će prisutnost „bazalne” markera. Takvi tumori imaju lošu prognozu. U većini tih „bazalna” tumora u potpunosti odsutna ER, PR (receptori za estrogen i progesteron) i HER2 proteina. Oni su često metastazira na mozak, pluća.

Danas ne postoji konsenzus o imunohistokemijske profil (IHC markera koji bi trebao biti prisutan), koji bi jasno definirati „bazalna” rakove. Ovi tumori s lošom prognozom uključuje takozvani „trostruki negativan karcinom dojke”, u kojoj nema ER, PR i HER2, a izražen bazalnih citokeratine 5/6 i 14, receptor epidermalnog faktora rasta (EGFR) i C-KIT. Oni također mogu izraziti P-kadherina i često p63.

Postoje sličnosti između „bazalni” raka dojke i raka koji su otkriveni u žena s BRCA1 mutacijom.

EGFR je izražena često u „bazalna” karcinoma tako da pacijenti s takvih tumora mogu imati koristi u liječenju inhibitora EGF-R.

IHC markera proliferacije (stopa rasta tumora)

Broj ili postotak mitoze stanica u mitozi, odavno smatra morfološka „biomarkera” rak prognoze. Postoji nekoliko IHC markera koji pokazuju proliferativna aktivnost stanica (broj mitoza):

• Ki67 - antigen koji se izražava u jezgrama stanica u svim fazama staničnog ciklusa i koristan pokazatelj stanične proliferacije;
• MIB1 - protutijelo koje reagira sa Ki-67 u tkivu ili formalinom fiksiranih parafin;
• PF3.

IHC biljezi apoptoze

Apoptoza, ili „programirana stanična samoubojstvo„je biomarkera agresivne tumore. apoptozom proteini mogu se prepoznati po IHC:

• Bcl-2;
• Bax;
• Bcl-X.

Ostali „budućnost” markere

• p53. Mutacije u tumorskog supresorskog gena p53 (TP53) otkrivena je u 20-30% slučajeva raka dojke. Ove mutacije gena su češći u žena s nasljednim sindroma raka dojke od žena sa sporadičnim raka. U bolesnika s genetska predispozicija za rak dojke može preporučiti testiranje p53. Otkrivanje mutacije u p53 također smatrati kao mogući prediktor odgovora raka dojke na kemoterapiji, ali detekcija proteina p53 imunohistokemijski u tumor ne odražavaju stanje mutacije p53.
• Topoizomeraza II alfa. To je cilj na kojem se radnja usmjeren antracikline - kemoterapeutski lijek koji se često koristi u liječenju karcinoma dojke.